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伯樂bio-rad轉印槽使用方法步驟
點擊次數:970 發布時間:2017-10-11 返回
  伯樂bio-rad轉印槽可快速、高質量地轉印小型凝膠。作為Mini-PROTEAN 3 電泳系統的一個組件,伯樂bio-rad轉印槽能容納2 個凝膠支架轉印夾,用于在Mini-PROTEAN 3 電泳槽內電轉印兩種小凝膠(Mini-PROTEAN 3 凝膠和ReadyGel 預制膠)。
  伯樂bio-rad轉印槽特點包括:
  1.1小時內轉印2 塊7.5 x 10 cm 凝膠;也可進行低強 度的過夜轉印
  2.電極絲相距4cm,以產生強電場保證有效的蛋白轉印
  3.顏色標記的轉印夾和電極,確保轉印過程中凝膠 的正確定向
  4.內置bio-rad冷卻裝置,快速吸收轉移過程中產生 的熱量
  5.既可作為完整的獨立設備,又可作為一個模塊與 Mini-PROTEAN 3 轉印槽的緩沖液槽和蓋兼容
  伯樂bio-rad轉印槽使用方法步驟:
  全程請戴手套操作,以免污染伯樂bio-rad轉印槽!
  1)電泳后SDS-PAGE 膠片浸在轉印緩沖液中,洗2~3 次,每次10min.
  2)取出伯樂bio-rad轉印槽,先小心放一攪拌子在底部,再倒一半轉印緩沖液。
  3)取轉印紙切成約如膠片大小,先在方形培養皿中以少許甲醇浸濕數秒鐘,再置入伯樂bio-rad轉印槽中的緩沖液10 min 后使用。 另取兩張濾紙,以及兩片方形海綿墊,都放在伯樂轉印槽的緩沖液中備用。
  4)取出轉印夾打開平放,先墊一張方形海棉墊,鋪上一張濕濾紙,小心平鋪SDS-PAGE膠上去,然后小心迭上已潤濕的轉印紙,用涂菌玻璃棒趕出氣泡;轉印紙再滴上數滴緩沖液后,加蓋一層濾紙,及另一張海綿,也都不可陷入氣泡,即可把整個轉印三明治卡夾裝好。
  膠迭到轉印紙時,zui好一次成功,不要重作,否則蛋白質色帶可能會印上去,zui后產生重迭影像。
  5)將轉印三明治置入已經放有一半轉印緩沖液的伯樂bio-rad轉印槽中,注意有轉印紙的那一面向正極(紅色),膠片那面向負極(黑色)。
  6)當三明治都放入伯樂bio-rad轉印槽后,以轉印緩沖液蓋滿所有的三明治,小心動一動卡夾,除去附在卡夾內外的氣泡,蓋上蓋子,放到一攪拌器上,打開攪拌器開始攪拌,同時接好電源,裝置完成后放置10 min.
  7)以300mA開始轉印,溫度會漸漸上升,轉印1.5 h左右 后中止轉印,取出轉印三明治,打開后依次取出轉印紙及膠。
  具體轉印條件要根據蛋白的大小進行優化,注意低溫。
  8)轉印后的膠片可以繼續進行染色,看有無蛋白質殘留。若電泳時加有藍色標準蛋白質marker(SeeBlue),則可在轉印紙上看到藍色的色帶,確定轉印成功,并可評估轉印效率。
電話:
86-021-51619380
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儀器部:

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