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移液器的檢測和校準
點擊次數:785 發布時間:2011-03-14 打印本頁面 返回

(一)氣密性檢測

移液器吸滿液體后,手持垂直放置15s,檢查吸嘴的尖頭有無液滴,如有,則說明漏氣。

(二)準確性檢測

1)量程小于1μl,建議使用分光光度法檢測。將移液器調至目標體積,然后移取染料溶液,加入一定體積的蒸餾水中,測定溶液的稀釋度(334nm或340nm),重復幾次移液操作,計算移液器的度。

2)量程大于1μl,可以用稱重法檢測。通過對水的稱重,轉換成體積(體積=質量/密度),鑒別移液器的準確性。由于水的密度是隨著溫度變化而變化,且稱量天平本身度不符合檢測要求,檢測又大多在一個開放式空間內操作,偏差在所難免。因而,此種稱量法只能現場粗略地判斷移液器的準確性,進一步的校準必須在專業的實驗室操作進行。

注意:稱重法實驗室必備條件是高度靈敏的分析天平(定期校準)、雙蒸水和稱量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度(20℃時水的密度為0.09982)。

二、專業校準

移液器的工作量大,長期使用,將會使彈簧彈力發生變形,加之本身是塑料,不耐磨擦,就會產生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準確性,必須對移液器進行定期校準。為了更好地發揮該類計量儀器的作用,對新購進的儀器要進行校準才能使用;對正在使用的計量儀器,由于長期使用會造成其示值于度量對象的誤差,這種誤差若不進行控制,及時校正,必定會影響科研工作。因此,對使用的移液器要定期檢定、校正,并建立檔案,只有這樣才能使其在日常工作中更好的發揮作用。

目前,在許多實驗室條件下進行的常規檢測并不能完全取代專業的校準工作,因為校準對于外部環境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術要求,而這些條件往往是大多數實驗室無法提供的。現在一些大型的移液器制造商均采用全球統一的移液器標準操作規范,利用專業軟件校正系統,通過計算機對分析天平進行在線控制,測量、數據采集、計算、結果評價等環節由軟件控制完成,所有人為操作都被計算機記錄隨報告打印出來,采用電腦對數據進行評估認證,完全排除了人為操縱校準結果的可能性,并制定當地代理商提供專業的校準和維修服務。下面以Eppendorf公司為例,介紹其專業校準操作。

(一)校準的基本操作條件

操作室:獨立房間,顯示溫度和濕度狀態。

溫度控制:15~30℃(±0.5℃)

濕度控制:60%~90%

工作臺面:防震、防塵、遠離熱源、無陽光直射。

天平:0.000 01g精密分析天平(小數點后5位),每年需由廠家進行校準。

防蒸發裝置:Eppendorf提供的濕度阱,防止稱量液體的揮發。

測試介質:雙蒸水,每4h更換一次,批次更換周期不大于2周。

(二)操作過程

1)同溫化處理:校正前,所有移液器及校正介質(如工作臺、天平、雙蒸水等)置于相同操作間至少4h,以確保它們具有相同的溫度。

2)內外部清洗。

3)潤滑活塞。

4)校準:采用三點校準法,即根據移液器量程范圍,選取zui低量程、中間值和zui高量程三點分別測試10次,各個測試點取其平均值,計算其準確度(inaccuracy)和度(imprecision),評價標準符合DIN 12650要求。

5)  校準報告:可根據客戶需求提供給算計打印的標準報告或PICASO校正報告,符合ISO、DIN或ASTM相關標準。

三、影響準確性的因素

1)操作錯誤:包括30℃手持式移液器吸液;與吸嘴不匹配,較易造成脫落;殘留的試劑倒流,污染活塞和密封圈;快速吸液排液,導致部分液體殘留在吸頭上等都會影響準確性。

2)移液器損壞:包括移液器的頭部被刮擦,斷裂受損;活塞受污染;彈簧受腐蝕等。

3)操作條件的影響:包括未作調整吸取與水不同密度的液體;樣品和移液器的差別太大等。

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